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篇1:一株植物病原真菌拮抗细菌的分离与鉴定
一株植物病原真菌拮抗细菌的分离与鉴定
从泰山土壤中分离获得一株对多种植物病原真菌具有拮抗作用的细菌.经过形态观察、生理生化特征分析及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),该菌株的16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为AY756511.
作 者:薛东红 刘训理 陈凯 吴凡 王智文 何亮 XUE Dong-hong LIU Xun-li CHEN Kai WU Fan WANG Zhi-wen HE Liang 作者单位:薛东红,刘训理,陈凯,吴凡,王智文,XUE Dong-hong,LIU Xun-li,CHEN Kai,WU Fan,WANG Zhi-wen(山东农业大学林学院,山东,泰安,271018)何亮,HE Liang(西北农林科技大学,陕西,杨陵,712100)
刊 名:山东农业大学学报(自然科学版) ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF SHANDONG AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 37(1) 分类号:Q939.9 关键词:拮抗细菌 蜡状芽孢杆菌 鉴定篇2:细菌分离鉴定
细菌分离鉴定
细菌分离鉴定目的要求:
熟悉临床标本中常见的病原性细菌的分离鉴定方法。
实验内容:
一、脓汁、咽拭子等标本中病原性细菌的分离与鉴定
(一)标本采集
1.脓拭子:用无菌棉签蘸取患处深部脓液或分泌物少许,置入无菌空试管内,送检。
2.痰拭子:用消毒容器收集病人痰液,用无菌棉签挑取脓稠痰块,置入无菌空试管内,送检。
3.咽拭子:嘱病人把口张大,用压舌板压住舌根,用无菌棉签迅速蘸取咽部分泌物,置入无菌空试管内,送检。
4.血标本:疑为败血症患者,在严格无菌操作下,静脉采血,床旁直接加入含50ml的肉汤瓶内,立即摇匀后送培养。
5.脑脊液:对疑似流脑患者,作腰椎穿刺取脑脊液,立即行直接床旁接种(送检过程中应注意保温)。
6.尿道、阴-道分泌物:对可疑淋病患者,男性可从尿道取材,取材时导尿管应进入尿道1cm~2cm,如为刚排尿,应等待1h左右;女性则可以从宫颈口取分泌物,当内窥器插入宫颈口后应稍等片刻,再旋转取出,取材应立即送检,不可放置冰箱。
(二)分离鉴定程序
待检标本可直接做涂片染色检查鉴定,必要时可做分离培养、生化反应及致病性鉴定。常见的致病性球菌检查程序如下。
直接涂片、革兰染色、镜检(形态、排列、染色性)
脓、痰、咽拭子
分泌物、脑脊液 观察菌落性状、溶血性、色素
血琼脂平板→ 涂片、染色、镜检
↑ 挑取可疑菌落 生化反应
血液、穿刺液 →肉汤培养基 纯分离 致病性测定
↓ 药敏试验
如培养液混浊时可涂片、染色、镜检
(三)常见临床标本的检查方法
1.脓拭子
在脓汁中除了球菌外,也有杆菌存在,例如革兰阳性的有炭疽杆菌、白喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌等,革兰阴性的'有大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等,此外尚可有真菌、放线菌、螺旋体等。
材料
(1) 标本:脓拭子
(2) 培养基:血琼脂平板
(3) 兔血浆、白色滤纸片、无菌生理盐水、载玻片
方法脓汁 → 革兰染色 → 镜检
↓ ↑
血琼脂平板 →观察菌落形态及溶血情况
↓
致病力试验
(1)将脓拭子作革兰染色,镜检(先作培养再涂片以免污染)。标本放置4℃冰箱保存,待报告发出后再丢弃。
(2)将脓汁涂布于血琼脂平板上,再以灭菌接种环作划线分离。置培养37℃培养18h~24h。
(3)经培养后据菌落特点及涂片检查结果进行初步识别,根据需要再作进一步鉴定。若菌落较大、溶血透明、产生金黄色色素、涂片为革兰阳性球菌并成堆排列时可能系葡萄球菌,应确定其为何种葡萄球菌;必要时再作血浆凝固酶试验及甘露醇发酵试验,确定其致病力。
2.咽拭子
咽喉中存在的细菌较多,可以有厌氧及需氧性链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、四联球菌、脑膜炎球菌、卡他球菌、喉杆菌、结核杆菌枯草杆菌、百日咳杆菌肺炎杆菌及绿脓杆菌等。此外也可有白色念珠菌奋森螺旋体等。本实验以咽拭子作为标本,重点检查病原性球菌。
材料
(1)标本:咽拭子。
(2)培养基:血琼脂平板。
方法
咽拭子
↓
血琼脂平板
↓
观察菌落形态及溶血性
↓
革兰染色,镜检
取标本涂布于血琼脂平板,再以灭菌接种环划线分离,置37℃培养18h~24h培养。标本放置4℃冰箱保存,待报告发出后再丢弃。
可根据下述特点进行鉴别:
(1)在菌落周围产生2mm~4mm宽、界线分明、完全透明的溶血环、涂片为革兰阳性球菌并呈链状排列,可能是乙型溶血性链球菌。
(2)菌落细孝半透明、有草绿色溶血环、涂片为革兰阳性球菌呈链状排列,可能为甲型溶血性链球菌。需要进一步与肺炎球菌区别时,可做胆汁溶菌试验及菊糖发酵反应。
菌落细小半透明、不溶血、涂片为革兰阳性链状排列的球菌时,为丙型链球菌。
(4)菌落扁平边缘隆起、中央稍凹、半透明、呈草绿色溶血、革兰染色为阳性双球菌、呈矛头状排列时为肺炎球菌,应以胆汁溶菌及菊糖发酵反应与甲型溶血性链球菌区分。
(5)菌落中等大孝表面光滑、呈灰色、革兰染色为阴性双球菌,呈肾形排列时,可能为脑膜炎球菌,需要进一步作氧化酶试验及糖发酵试验(接种于含血清之葡、麦、蔗糖发酵管中)。
二、粪便标本中肠道杆菌的分离与鉴定
(一)标本收集
取患者的粪便或肛-门拭子。
(二)鉴定程序
肠道杆菌为一大群革兰阴性杆菌,从形态及染色性上无法鉴别为何种菌,只能依靠生化反应和血清学反应进行鉴定。
患者粪便(粘液、脓血)→肠道选择、鉴别培养基(如ss、中国蓝、伊红美兰)
↓
挑取可疑菌落(据大孝颜色、透明度而定)
↓
双糖铁及其他鉴别培养基
↓
据结果分析鉴定
↓
玻片凝集(做出特异性诊断)
葡萄糖乳糖动力H2S尿素
±--艾希菌属非致病菌
+---克雷伯菌属
±+++变形杆菌
-++-乙型副伤寒致病菌
-+±-甲型副伤寒
+-++-伤寒杆菌
+----痢疾杆菌
篇3:一株高产几丁质酶细菌对植物病原真菌的抑制作用研究
一株高产几丁质酶细菌对植物病原真菌的抑制作用研究
用平板稀释分离法和透明圈法筛选到一株高产几丁质酶的革兰氏阳性菌NKZ-E,其单位透明圈的.大小为2.11.液体培养测定结果表明,该菌株的无菌培养滤液稀释50倍时,对玉米弯孢叶斑病菌具有较好的抑菌活性,其抑制率达69.86%;抑菌谱的测定结果也表明菌株NKZ-E对5种供试真菌也具有较好的抑菌活性,菌丝生长抑制率均高于50%.光镜观察发现,处理后的玉米弯孢叶斑病菌菌丝表现不同程度的畸形,细胞彭大呈球形,说明该细菌菌株产生的胞外几丁质酶可能与病菌菌丝生长受抑制密切相关.
作 者:古丽皮艳 黄丽丽 康振生 Gulpiye HUANG Li-li KANG Zhen-Sheng 作者单位:西北农林科技大学植物保护学院,陕西杨凌,712100 刊 名:西北农业学报 ISTIC PKU英文刊名:ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA 年,卷(期): 15(6) 分类号:S476 关键词:细菌 几丁质酶 透明圈篇4:一株仙人掌植物内生真菌的分离鉴定及活性研究
一株仙人掌植物内生真菌的分离鉴定及活性研究
从元江仙人掌的茎中分离到一株产广谱、高活性抑菌物质的内生真菌,经测定对细菌、植物病原真菌和皮肤致病真菌共21种病原微生物有较为明显的抑制作用.形态特征表明,该菌株与曲霉属(Aspergillus)中的土生曲霉(Aspergillus terreus)的特征基本一致,18S rDNA序列分析显示本菌株与土生曲霉的同源性高于99%,但该菌株的`分生孢子梗上有明显的瘤状突起,不同于模式菌株.因此认为该菌株为土生曲霉的一个变种,命名为土生曲霉云南变种(Aspergillus terreus var.yunnanensis).并对其活性物质的生产条件进行了初步摸索,确定用查氏培养基为最佳种子培养基,PDA培养基为最佳发酵培养基,4d为最适发酵时间.
作 者:秦盛 陈有为 邢珂 张琦 吴少华 李治滢 李绍兰 杨丽源 夏国兴 作者单位:秦盛,陈有为,邢珂,张琦,吴少华,李治滢,李绍兰,杨丽源(云南大学云南省微生物研究所,昆明,650091)夏国兴(夏翰生物工程(上海)有限公司,上海,51)
刊 名:微生物学通报 ISTIC PKU英文刊名:MICROBIOLOGY 年,卷(期):2006 33(4) 分类号:Q939.97 关键词:内生真菌 土生曲霉 抑菌活性篇5:一株菲降解细菌的分离鉴定及其特性
一株菲降解细菌的分离鉴定及其特性
摘要:通过选择性富集培养,从沈抚灌区石油污染土壤中分离到1株菲降解细菌.试验证明该菌株能以菲为唯一碳源和能源生长.经形态学、生理生化鉴定和16S rRNA基因序列比对分析,确定该菌株属于不动杆菌属,命名为Acinetobacter sp. L2. 系统发育进化分析发现,L2菌株与Acinetobacter sp. DG880[AY258108]亲源关系最近.L2菌株培养7 d后对菲的降解率达96.3%.邻苯二酚2,3-双加氧酶活力测定表明,L2菌株可能含有菲降解基因.作 者:祝儒刚 钟鸣 周启星 刘海宁 李玉双 ZHU Rugang ZHONG Ming ZHOU Qixing LIU Haining LI Yushuang 作者单位:祝儒刚,钟鸣,刘海宁,李玉双,ZHU Rugang,ZHONG Ming,LIU Haining,LI Yushuang(沈阳农业大学辽宁省农业生物技术重点实验室,沈阳,110161)周启星,ZHOU Qixing(中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室,沈阳,110016)
期 刊:应用生态学报 ISTICPKU Journal:CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY 年,卷(期):, 17(11) 分类号:X172 关键词:菲 16SrRNA Acinetobacter 生物降解 邻苯二酚2,3-双加氧酶篇6:三株甜瓜拮抗细菌的筛选与鉴定
三株甜瓜拮抗细菌的筛选与鉴定
以甜瓜根腐病病原菌(Fusarium solani)为指示菌,从甜瓜根际筛选到两株具有明显拮抗效果的细菌,编号为F22,T5b.以甜瓜霜霉病病原菌(Pseudoperonospora cubensis)为指示菌,从甜瓜健康叶际中筛选出一株具有拮抗效果的细菌,记为B11b.经过形态学观察、生理生化测定,16S rDNA序列及系统发育分析,初步鉴定T5b为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),F22,B11b为斯式假单胞菌(Pseudomonas stutzeri).T5b,F22,B11b的.16S rDNA序列的GenBank登录号分别为EU771077,EU771075,EU771074.
作 者:路晓萌 姚良同 赵丽明 杜秉海 丁延芹 作者单位:山东农业大学生命科学学院,农业微生物学重点实验室,泰安,271018 刊 名:生物技术通报 PKU英文刊名:BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年,卷(期): “”(5) 分类号: 关键词:根腐病 霜霉病 拮抗菌 根际 叶际篇7:一株溶藻细菌(Pseudoalteromonas sp.)的分离鉴定及溶
一株溶藻细菌(Pseudoalteromonas sp.)的分离鉴定及溶藻活性初探
摘要:从海南洋浦港沉积物中分离到一株具有较强溶藻活性的`细菌(编号Z3).通过对该菌株进行形态和生理测试以及16SrDNA序列分析,初步鉴定此菌为交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.).该菌对链状亚历山大藻(Alexan-drium catenella)和塔马亚历山大藻(Alexandrium tamarense)有溶藻活性,对锥状斯氏藻(Scrippsiella trochoidea)和中肋骨条藻(Skeletonema costatum)的生长无影响,表明菌株Z3溶藻活性具有种属特异性.通过该菌的菌体悬浮液和除去菌体滤液对链状亚历山大藻实验表明,此菌株具既有直接溶藻作用又有间接溶藻活性.作 者:黄姿 李春强 于晓玲 廖文彬 孙建波 彭明 HUANG Zi LI Chun-qiang YU Xiao-ling LIAO Wen-bin SUN Jian-bo PENG Ming 作者单位:中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101 期 刊:海洋技术 PKU Journal:OCEAN TECHNOLOGY 年,卷(期):, 27(3) 分类号:X55 关键词:溶藻细菌 链状亚历山大藻 交替假单胞菌 赤潮篇8:一株光合细菌的分离鉴定及污水处理能力研究
一株光合细菌的分离鉴定及污水处理能力研究
光合细菌(photosynthetic bacteria, 简称PSB)是一种在自然界广泛存在的具有光能合成体系的.原核微生物,除可用作饲料添加剂外,还具有在好氧、微氧、厌氧多种条件下代谢废水中有机化合物、难降解卤化物等的能力,具有一定的工农业应用前景.本实验以实验室废水处理反应器活性污泥为材料,采用液体富集培养、平板反复划线分离方法,得到一株光合细菌,命名为PSB-O.经菌落形态特征、细胞形态特征、活细胞光吸收光谱特征、生理生化特性及16S rRNA基因分析,将PSB-O菌株鉴定为Rhodopseudomonas sp..将该菌用于连续培养反应器处理合成有机废水试验,结果表明PSB-O可以有效去除合成有机废水中的COD,在稀释率为0.025 h-1时去除率达到最高62.8%,可以用于有机废水处理.
作 者:周洪波 刘飞飞 邱冠周 ZHOU Hongbo LIU Feifei QIU Guanzhou 作者单位:中南大学资源加工与生物工程学院,湖南,长沙,410083 刊 名:生态环境 ISTIC PKU英文刊名:ECOLOGY AND ENVIRONMENT 年,卷(期):2006 15(5) 分类号:X172 关键词:光合细菌 鉴定 生长特性 有机废水- 甲基对硫磷降解菌Alcaligenes.sp.YcX-20的分离鉴定及降2025-02-07
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