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篇1:优化分离及培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的实验研究
优化分离及培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的实验研究
[目的]探讨分离培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的最佳条件,并观察其生物学活性.[方法]采用优化分离方法,常规细胞培养、传代技术,光镜技术及细胞增殖活性检测法,观察不同浓度血清、不同接种密度对骨髓间充质类成纤维样集落细胞生长、增殖、形态及集落形成率的`影响,观察培养细胞的生物学特性并将该类细胞向成骨细胞诱导分化.[结果]以差速贴壁法,加入10%进口胎牛血清、接种密度为5×104个/ml的培养条件为最适宜细胞生长;在此条件下,具有快速增殖的能力及较高的集落形成率;光镜下细胞呈梭状或类成纤维状,2~8代的细胞呈均质状;诱导后的成骨细胞AKP检测成阳性.[结论]明确了骨髓间充质类成纤维样集落细胞培养所需的细胞接种密度,血清培养浓度,该类细胞具有干细胞特性,为进一步深入研究该类细胞的应用打下了基础.
作 者:张璇 林春博 杨渊 谢富荣 作者单位:张璇,杨渊,谢富荣(广西骨伤医院,广西,南宁,530012)林春博(广西中医学院,广西,南宁,530001)
刊 名:广西中医学院学报 英文刊名:JOURNAL OF GUANGXI TRADITIONAL CHINESE MEDICAL UNIVERSITY 年,卷(期): 12(4) 分类号:Q25 关键词:优化分离 优化培养 骨髓间充质类成纤维样集落细胞篇2:大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化研究
大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化研究
目的:建立和优化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的.分离培养条件,以获得群体均一、未分化状态保持良好的MSCs.方法:收集不同周龄大鼠骨髓细胞;以不同浓度Percoll密度梯度离心分离骨髓单个核细胞;以60%低糖DMEM40%MCDB201为基础培养基,培养24h去悬浮细胞;以不同接种密度传代培养;碱性磷酸酶染色和油红O染色考察MSCs向骨和脂肪组织分化的潜能.结果:采用57%Percoll液的分离效果优于70%Percoll液.6周龄(体重约180g)大鼠能在细胞分离的质和量上达到最佳效果.24h进行悬浮细胞去除、5×103/cm2接种密度传代培养,光镜和电镜显示MSCs增殖能力强,功能状态活跃,成脂成骨实验显示多向分化潜能保持良好.结论:优化大鼠周龄、分离液的密度、细胞培养条件及改进培养方法有助于获得多向分化潜能保持良好的均一的MSCs.
作 者:晏丹 舒赛男 YAN Dan SHU Sai-nan 作者单位:晏丹,YAN Dan(武汉科技大学医学院病理教研室,湖北,武汉,430065)舒赛男,SHU Sai-nan(华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北,武汉,430030)
刊 名:现代生物医学进展 ISTIC英文刊名:PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年,卷(期): 8(1) 分类号:Q813.1 关键词:间充质干细胞 分离 培养 优化篇3:成体狗骨髓间充质干细胞的分离和体外培养的初步研究
成体狗骨髓间充质干细胞的分离和体外培养的初步研究
目的 探索成体狗骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养,为其将来应用提供实验依据.方法 无菌条件下抽取狗肋骨骨髓,Ficoll分离液(密度1.077g/ml)梯度离心分离单个核细胞,在含10%新生牛血清的DMEM中,37℃、5%CO2、饱和湿度下常规培养,取贴壁细胞并进行传代,观察细胞的生长形态.结果 取得较高纯度的成体狗骨髓MSCs,并保持细胞的活性;成体狗骨髓MSCs在体外培养中,为贴壁生长的单个核球形细胞,培养3~4d后开始大量增殖,为纺锤形和星形多突起的细胞贴壁生长,6~8d细胞达到70%~90%融合.传代细胞3~4d即可再次传代.结论 采用Ficoll分离液进行梯度离心分离,可获较高纯度的MSCs,是实用、便捷和可行的.方法 ;而且在体外培养的条件下能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,可以成为进一步进行细胞扩增或其它实际应用的基础.
作 者:雷开键 杜一平姜雄 熊永祥 贾钰铭 宋玉光 林萍 罗华 作者单位:宜宾市第二人民医院肿瘤科,四川,宜宾,644000 刊 名:四川医学 ISTIC英文刊名:SICHUAN MEDICAL JOURNAL 年,卷(期): 28(10) 分类号:Q813.1 关键词:间充质干细胞 细胞培养 体外 骨髓 狗篇4:成骨诱导后骨髓间充质干细胞与A-WMGC支架材料联合培养的实验研究
成骨诱导后骨髓间充质干细胞与A-WMGC支架材料联合培养的实验研究
目的 研究多孔磁性硅灰石/磷灰石玻璃陶瓷载体A-WMGC支架(apatite-wollastonite magnetic glass ceramic,A-WMGC)作为组织工程骨支架的可行性.方法 体外培养兔骨髓间充质干细胞,在成骨诱导剂地塞米松等的诱导下,向成骨细胞转化,并使之与修饰后A-WMGC支架复合,通过倒置相差显微镜和扫描电子显微镜观察细胞贴附情况.结果 地塞米松等诱导组细胞形态向类成骨细胞转化,碱性磷酸酶表达明显增高,并表达Ⅰ型胶原.A-WMGC支架具有合适的`微孔结构,材料大孔孔径为300~400μm,且孔道相互贯通,体外复合培养10小时,成骨细胞即开始贴附于支架上,复合培养7天,成骨细胞在支架上分化增殖,分泌细胞外基质.结论 适当浓度成骨诱导剂可成功的将兔BMSCS成骨细胞诱导,修饰后A-WMGC支架是骨组织工程的良好载体.
作 者:王岩松 刘丹平周大利 梅晰凡 WANG Yansong LIU Danping ZHOU Dali MEI Xifan 作者单位:王岩松,WANG Yansong(辽宁医学院附属第一医院急诊科)刘丹平,梅晰凡,LIU Danping,MEI Xifan(辽宁医学院附属第一医院骨外科,辽宁,锦州,121001)
周大利,ZHOU Dali(四川大学材料科学与工程学院,四川,成都,610064)
刊 名:辽宁医学院学报 英文刊名:JOURNAL OF LIAONING MEDICAL UNIVERSITY 年,卷(期): 30(2) 分类号:Q813 关键词:骨髓间充干质细胞 成骨诱导 A-WMGC载体 生物相容性篇5:成人骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞后的维持培养
成人骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞后的维持培养
目的:探讨体外诱导成人骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)分化为神经元样细胞后长期培养的可行性.方法:自成人红骨髓分离培养BMSCs,通过克隆培养、成骨分化、成脂肪分化鉴定其特性,取第3代细胞重新接种,经碱性成纤维生长因子预诱导及β-巯基乙醇诱导后,换维持培养液维持培养,观察其分化及生长情况.结果:成神经元诱导分化0.5h后,多数细胞即开始呈现出神经元样外观,5h后绝大多数细胞表现出典型的神经元样外观,维持培养1周后,大多数细胞继续维持神经元样外观,免疫组织化学染色示65%±3.3%的细胞微管相关蛋白-2染色阳性,43%±2.1%的'细胞神经微丝-160染色阳性.结论:成人BMSCs经诱导后半数左右的细胞可分化为神经元样细胞,在优化的培养体系中,分化的神经元样细胞可存活1周以上.
作 者:陈秉耀 侯树勋 祁彦霞 阕海萍 刘少君 作者单位:陈秉耀,侯树勋(解放军总医院第一附属医院骨科,全军骨科研究所,100037,北京市)祁彦霞(宁夏彭阳县人民医院内科,756500,宁夏彭阳县)
阕海萍,刘少君(军事医学科学院基础医学研究所,100850,北京市)
刊 名:中国脊柱脊髓杂志 ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD 年,卷(期): 16(6) 分类号:Q813.1 关键词:骨髓间充质干细胞 诱导分化 神经元样细胞 人篇6:骨生物衍生材料复合人骨髓间充质干细胞异位成骨的实验研究
骨生物衍生材料复合人骨髓间充质干细胞异位成骨的实验研究
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)复合骨生物衍生材料异位成骨的.可行性和成骨能力.方法 将人骨生物衍生材料脱蛋白骨和脱钙骨在体外与人骨髓MSCs复合培养后,植入裸鼠背部左侧皮下.右侧皮下植入单纯生物衍生材料作为对照.于术后2,4,10周各时间点处死动物行大体标本、组织学观察,碱性磷酸酶(ALP)活性检测,比较其成骨能力.结果 两种材料脱蛋白骨和脱钙骨均有异位成骨能力,随着植入时间的延长,新骨形成量逐渐增多,表现为软骨化成骨;对照组无成骨现象.ALP活性检测结果显示实验组随着时间的延长,ALP活性显著升高(P<0.05),而在相同各时间点比较,脱蛋白骨的ALP活性明显高于脱钙骨(P<0.05).结论 人骨生物衍生材料脱蛋白骨及脱钙骨和人骨髓MSCs可作为理想的支架材料和种子细胞应用于骨组织工程;且作为支架材料脱蛋白骨优于脱钙骨.
作 者:康非吾 唐休发 温玉明 吴正华 黄欣 KANG Fei-wu TANG Xiu-fa WEN Yu-ming WU Zheng-hua HUANG Xin 作者单位:康非吾,KANG Fei-wu(同济大学附属口腔医院,口腔颌面外科,上海,200072)唐休发,温玉明,黄欣,TANG Xiu-fa,WEN Yu-ming,HUANG Xin(四川大学华西口腔医院,口腔颌面-头颈肿瘤外科,四川,成都,610041)
吴正华,WU Zheng-hua(山东大学齐鲁医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012)
刊 名:华西口腔医学杂志 ISTIC PKU英文刊名:WEST CHINA JOURNAL OF STOMATOLOGY 年,卷(期):2006 24(4) 分类号:Q254 关键词:骨髓间充质干细胞 骨生物衍生材料 骨组织工程