甘蔗线虫病抗性基因的PCR检测研究

时间:2023年09月21日

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来源:沈云生

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篇1:甘蔗线虫病抗性基因的PCR检测研究

甘蔗线虫病抗性基因的PCR检测研究

以38份未经线虫病常规鉴定的甘蔗种质资源为供试材料,根据番茄抗根结线虫病基因和甜菜抗胞囊线虫病基因的.保守序列区域,分别设计了2条上游引物、2条下游引物,对设计的引物进行组合后,应用PCR特异扩增从中分别筛选出各1对特异引物.用抗根结线虫基因设计的特异引物进行扩增最终获得了1条大约460bp大小的特异片段;用抗胞囊线虫基因设计的特异引物进行扩增最终获得了1条大约690 bp大小的特异片段,进一步进行了PCR-Southern杂交,确认了该2条特异引物的真实性.

作 者:吴杨 周会 潘大仁 WU Yang ZHOU Hui PAN Da-Ren  作者单位:福建农林大学作物学院,福建,福州,350002 刊 名:作物学报  ISTIC PKU英文刊名:ACTA AGRONOMICA SINICA 年,卷(期): 32(6) 分类号:S4 关键词:甘蔗   抗线虫基因   基因检测   PCR-Southern杂交  

篇2:马铃薯及其制品中转基因成分的多重PCR检测

马铃薯及其制品中转基因成分的多重PCR检测

采用CTAB法提取15个马铃薯及其制品样品中的`总DNA,内源PATA基因的PCR扩增结果均为阳性,表明已提取到DNA.应用根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子和大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶Ⅱ(npt Ⅱ)基因的二重PCR对样品进行转基因成分检测,结果均为阴性.将马铃薯DNA和阳性质粒pBI121混合作为PCR的反应模板,建立了内源PATA基因、花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子、nos终止子和npt Ⅱ基因之间的多重PCR检测方法.多重PCR方法具有节约试剂、节省时间等特点,在转基因产品检测上的应用值得推广.

作 者:邵碧英 陈文炳 杨婕 SHAO Bi-ying CHEN Wen-bing YANG Jie  作者单位:福建出入境检验检疫局,福建,福州,350003 刊 名:食品科学  ISTIC PKU英文刊名:FOOD SCIENCE 年,卷(期):2006 27(1) 分类号:Q78 关键词:马铃薯   转基因成分   多重PCR  

篇3:羊流产衣原体的PCR检测方法研究

羊流产衣原体的PCR检测方法研究

根据羊流产衣原体16S rRNA基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地扩增出预期的523bp片段,而沙眼农原体、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及健康鸡胚的`卵黄囊膜均未扩增出相应的片段.敏感性试验表明,该体系可检测到2 pg的衣原体DNA.

作 者:张莉 王英珍 鄢明华 李秀丽 ZHANG Li WANG Ying-zhen YAN Ming-hua LI Xiu-li  作者单位:天津市畜牧兽医研究所,天津,300112 刊 名:天津农业科学 英文刊名:TIANJIN AGRICULTURAL SCIENCES 年,卷(期): 15(2) 分类号:S852.67 关键词:羊流产衣原体   PCR   检测  

篇4:转基因白桦外源基因的多重PCR快速检测

转基因白桦外源基因的多重PCR快速检测

根据转化的载体序列上T-DNA中的目的基因bt,选择性筛选标记基因nptⅡ和报告基因gus设计三对特异性引物,PCR产物片断大小分别为247 bp、449 bp、668 bp,应用多重PCR (mutiplex-PCR)的方法同步检测18株转基因白桦中三个基因的'整合状况;用阳性对照为模板,对单重PCR(simplex-PCR)和多重PCR的各项指标进行比较.结果表明多重PCR检测多个外源基因在敏感性方面与单重PCR相比并没有减弱,而且略有提高;对18株样品的多重PCR同步检测无假阳性出现,结果准确,同时在操作中具有减少污染,缩短时间和节约成本等优点.因此,在对转基因白桦的外源基因的定期检测中,多重PCR是一种非常有效而便捷的方法,可以为转基因的拷贝数,T-DNA旁侧序列特征等转基因整合特性方面的研究提供数据.

作 者:詹亚光 苏涛 韩梅 孙冬 ZHAN Ya-Guang SU Tao HAN Mei SUN Dong  作者单位:詹亚光,苏涛,孙冬,ZHAN Ya-Guang,SU Tao,SUN Dong(东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,150040)

韩梅,HAN Mei(东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室,哈尔滨,150040)

刊 名:植物研究  ISTIC PKU英文刊名:BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH 年,卷(期): 26(4) 分类号:Q94 关键词:白桦   外源基因   T-DNA   多重PCR  

篇5:甘薯抗线虫病相关基因片段克隆及序列分析初步研究

甘薯抗线虫病相关基因片段克隆及序列分析初步研究

依据甜菜抗线虫病基因(Hs1pro-1)序列设计引物片段,对甘薯高抗线虫病品种金山25的.总DNA进行PCR扩增,获得1条600 bp左右的特异片段.序列测定及同源性检索表明,克隆序列与甜菜的Hs1pro-1基因具有一定的同源性.

作 者:潘大仁 陈观水 周以飞 郭金平陈建秋 PAN Da-ren CHEN Guan-shui ZHOU Yi-fei GUO Jin-ping CHEN Jian-qiu  作者单位:潘大仁,周以飞,陈建秋,PAN Da-ren,ZHOU Yi-fei,CHEN Jian-qiu(福建农林大学作物科学学院,福建,福州,350002)

陈观水,CHEN Guan-shui(福建农林大学生命科学学院,福建,福州,350002)

郭金平,GUO Jin-ping(福建烟草公司龙岩分公司,福建,龙岩,364000)

刊 名:福建农林大学学报(自然科学版)  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期):2006 35(1) 分类号:Q943.2 S531 关键词:甘薯   抗线虫病基因   克隆   序列分析  

篇6:转BAR基因水稻的抗性遗传、生理特性和农艺性状研究

转BAR基因水稻的抗性遗传、生理特性和农艺性状研究

为了明确BAR基因对水稻的影响,对转BAR基因的'Bengal HU-10、Bengal HC-11、Cypress PB-6、Cypress PB-13的抗性遗传、生理特性和农艺性状进行了研究,结果表明,它们对除草剂Liberty的抗性均受一对显性核基因控制,在这4个实验材料中,BAR基因在染色体上的整合位置互不等位,株高、生育期和每穗粒数等农艺性状也不相同.转BAR基因水稻与原亲本比较,叶片中叶绿素含量、光合速率和叶绿素荧光参数、GS酶活性等均未有明显差异,但用Liberty处理2 d后,上述生理性状变化明显,且在这4个转BAR基因材料之间也有显著差异,说明与BAR基因的插入位置有关.

作 者:段发平郑枫 段俊 黎垣庆 梁承邺 DUAN Fa-ping ZHENG Feng DUAN Jun LI Yuan-qing LIANG Cheng-ye  作者单位:中国科学院,华南植物园,广州,510650 刊 名:浙江大学学报(农业与生命科学版)  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES) 年,卷(期): 32(4) 分类号:Q81 关键词:转BAR基因水稻   抗性遗传   生理特性   农艺性状  

篇7:荧光定量PCR检测干旱胁迫下长春花Crlea基因的相对表达

荧光定量PCR检测干旱胁迫下长春花Crlea基因的相对表达

首次从长春花中克隆了Crlea(Crlea for Catharanthus roseus late embryogenesis abundant)的全长基因,采用荧光定量PCR方法对干旱胁迫下长春花叶片和根部Crlea基因的表达模式进行监测,结果表明,在0.5~8h的胁迫时间中,叶片和根部的Crlea基因表现出相似的'积累模式.长春花Crlea基因的表达随着胁迫时间的延长而表达增强.在叶片中,在6 h和8 h的干旱处理后,Crlea基因表达显著提高,分别是未处理材料的9.984和20.431倍.在根部, 在8 h的处理后,Crlea基因的表达量显著提高(2.831倍于对照).初步结果表明Crlea基因的表达没有组织特异性,并且为干旱胁迫正调控.

作 者:祖元刚 聂明珠 房思良 于景华 郭晓瑞 ZU Yuan-Gang NIE Ming-Zhu FANG Si-Liang YU Jing-Hua GUO Xiao-Rui  作者单位:东北林业大学森林生态学教育部重点实验室,哈尔滨,150040 刊 名:植物研究  ISTIC PKU英文刊名:BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH 年,卷(期):2006 26(4) 分类号:Q94 关键词:长春花   干旱胁迫   晚期胚胎丰富蛋白   荧光定量   相对表达   Catharanthus roseus   drought stress   lea gene   real time quantitative PCR   comparative expression  

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